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產(chǎn)生組織切片非特異性染色

日期:2025-01-08 18:20
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摘要: 產(chǎn)生組織切片非特異性染色 1、抗體孵育時(shí)間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時(shí)間、稀釋抗體來控制。這是重要的一條; 2、一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看; 3、內(nèi)源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細(xì)胞多的組織),需要通過延長滅活時(shí)間和增加滅活劑濃度來降低背景染色; 4、非特異性組分與抗體結(jié)合,這需要通過延長二抗來源的動物免 疫血清封閉時(shí)間和適當(dāng)增加濃度來加強(qiáng)封閉效果; 5、DAB孵育時(shí)間過長或濃度過高...

產(chǎn)生組織切片非特異性染色

1、抗體孵育時(shí)間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時(shí)間、稀釋抗體來控制。這是重要的一條; 

2、一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看; 

3、內(nèi)源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細(xì)胞多的組織),需要通過延長滅活時(shí)間和增加滅活劑濃度來降低背景染色; 

4、非特異性組分與抗體結(jié)合,這需要通過延長二抗來源的動物免 疫血清封閉時(shí)間和適當(dāng)增加濃度來加強(qiáng)封閉效果; 

5、DAB孵育時(shí)間過長或濃度過高; 

6、PBS沖洗不充分,殘留抗體結(jié)果增強(qiáng)著色,在一抗、二抗或SP孵育之后的浸洗尤為重要; 

7、標(biāo)本染色過程中經(jīng)常出現(xiàn)干片,這容易增強(qiáng)非特異性著色。