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熒光定量 PCR理想的內(nèi)參基因具備的條件

日期:2025-01-08 16:00
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摘要: 熒光定量 PCR 的主要用途之一即是相對(duì)定量,而提到相對(duì)定量,必然離不開(kāi)內(nèi)參。內(nèi)參基因即是分子實(shí)驗(yàn)中用于內(nèi)部參照的基因,它們?cè)诟鹘M織和細(xì)胞中的表達(dá)相對(duì)恒定,在檢測(cè)基因的表達(dá)水平變化時(shí)常用它來(lái)做參照物。其作用是校正上樣量、上樣過(guò)程中存在的實(shí)驗(yàn)誤差,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。 理想的內(nèi)參基因應(yīng)該滿足以下條件: 1、不存在假基因(Pseudogene),以避免基因組DNA的污染擴(kuò)增; 2、高度或中度表達(dá),排除低表達(dá)基因; 3、穩(wěn)定表達(dá)于各組織和細(xì)胞中; 4、表達(dá)水平與細(xì)胞周期以及細(xì)...


熒光定量 PCR 的主要用途之一即是相對(duì)定量,而提到相對(duì)定量,必然離不開(kāi)內(nèi)參。內(nèi)參基因即是分子實(shí)驗(yàn)中用于內(nèi)部參照的基因,它們?cè)诟鹘M織和細(xì)胞中的表達(dá)相對(duì)恒定,在檢測(cè)基因的表達(dá)水平變化時(shí)常用它來(lái)做參照物。其作用是校正上樣量、上樣過(guò)程中存在的實(shí)驗(yàn)誤差,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

理想的內(nèi)參基因應(yīng)該滿足以下條件:

1、不存在假基因(Pseudogene),以避免基因組DNA的污染擴(kuò)增;

2、高度或中度表達(dá),排除低表達(dá)基因;

3、穩(wěn)定表達(dá)于各組織和細(xì)胞中;

4、表達(dá)水平與細(xì)胞周期以及細(xì)胞是否活化無(wú)關(guān);

5、其穩(wěn)定的表達(dá)水平與目標(biāo)基因相近;

6、不受任何內(nèi)源性或外源性因素的影響,如不受任何實(shí)驗(yàn)處理方法的影響。