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細胞轉染常用步驟

日期:2025-01-08 15:48
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摘要: 常用步驟: 1. 轉染試劑的準備 ① 將400ul去核酸酶水加入管中,震蕩10秒鐘,溶解脂狀物。 ② 震蕩后將試劑放在-20攝氏度保存,使用前還需震蕩。 2. 選擇合適的混合比例(1:1-1:2/脂質體 [1]體積:DNA質量)來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質量的MyoD或者EGFP的DNA,震蕩后在加入合適體積的轉染試劑,再次震蕩。 3. 將混合液在室溫放置10―15分鐘。 4. 吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,用PBS或者無血清培養(yǎng)基清洗一次。 5. 加入混合液,將細胞放回培養(yǎng)箱中培...

常用步驟

1. 轉染試劑的準備

① 將400ul去核酸酶水加入管中,震蕩10秒鐘,溶解脂狀物。

② 震蕩后將試劑放在-20攝氏度保存,使用前還需震蕩。

2. 選擇合適的混合比例(1112/脂質體 [1]體積:DNA質量)來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質量的MyoD或者EGFPDNA,震蕩后在加入合適體積的轉染試劑,再次震蕩。

3. 將混合液在室溫放置1015分鐘。

4. 吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,用PBS或者無血清培養(yǎng)基清洗一次。

5. 加入混合液,將細胞放回培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一個小時。

6. 到時后,根據(jù)細胞種類決定是否移除混合液,之后加入完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)2448小時。