公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
CNE-2Z細(xì)胞 |
詳見說明書 |
FS-X5374 |
產(chǎn)品名稱:鼻咽癌細(xì)胞
來源:鼻咽癌
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘?,將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
齊墩果酸-3-O-β-D葡萄糖( 1→3)-α-L-鼠...英文名稱: N-(Phosphonomethyl)glycine solution膠質(zhì)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體包裝1g
齊墩果酮酸英文名稱: Phoximβ半乳糖苷酶抗體包裝5g
奇任(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nitrofen solutiongamma氨基丁酸B型受體1抗體包裝1ml
蘄蛇(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Naphthoxyacetic acidG蛋白/鳥苷酸結(jié)合蛋白抗體包裝1g
恰米英文名稱: N-(Trichloromethylthio)phthalimide solutionGDNF家族受體α4抗體 GDNFRα4包裝5g
千層紙素A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution神經(jīng)節(jié)肽抗體包裝1g
千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖酸苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oxadiazon谷氧還蛋白/巰基轉(zhuǎn)移酶抗體包裝100g
千斤拔(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pirimiphos-methyl solutionG蛋白偶聯(lián)受體GPR113蛋白抗體包裝25g
千金藤素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Propazine甘肽受體1抗體包裝5g
千金子二萜二乙酰苯酰酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Propyzamide生長抑制DNA損傷基因34抗體包裝1mg
千金子素L1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Procymidon生長分化因子1抗體包裝25mg
千金子素L2(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pymetrozin葡萄糖激酶抗體包裝5mg
千里光(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PropanilG蛋白偶聯(lián)受體78抗體包裝1g
千年?。?biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Imazalil solutionDNA結(jié)合抑制因子2抗體包裝250mg
牽牛子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Isoprothiolane solution粒趨化蛋白2抗體包裝25mg
CNE-2Z細(xì)胞堅強芽孢桿菌Human WNT10A(Protein Wnt-10a) ELISA KitAlias: WNT10AELISAKitReactivity: Human
臭紅菇Human RGS19(Regulator of G-protein signaling 19) ELISA KitAlias: RGS19|G-alpha-interactingprotein|GAIP|RGS19|GAIP|GNAI3IPELISAKitReactivity: Human
水稻黃單胞菌(水稻白葉枯菌)*Human PREX2(Phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate-dependent Rac exchanger 2 protein) ELISA KitAlias: PREX2|PtdIns(3|4|5)-dependentRacexchanger2|DEPdomain-containingprotein2|PREX2|DEPDC2ELISAKitReactivity: Human
康寧木霉Human PIM3(Serine/threonine-protein kinase pim-3) ELISA KitAlias: PIM3|KID1|Pim-3|Serine|threoninekinasePim-3ELISAKitReactivity: Human
玫瑰考克氏菌Human ZFP36(Tristetraprolin) ELISA KitAlias: ZFP36|TTP|G0|G1switchregulatoryprotein24|Growthfactor-induciblenuclearproteinNUP475|ProteinTIS11A|TIS11|Zincfingerprotein36homolog|Zfp-36|ZFP36|G0S24|ELISAKitReactivity: Human
成團泛菌Human PORCN(Probable protein-cysteine N-palmitoyltransferase porcupine) ELISA KitAlias: PORCN|ProteinMG61|PORCN|MG61|PORC|PPN|2.3.1.-ELISAKitReactivity: Human
魯毛霉Human GDF1(Embryonic growth/differentiation factor 1) ELISA KitAlias: GDF1|GDF-1|DORV|DTGA3|embryonicgrowth|differentiationfactor1|GDF-1|growthdifferentiationfactor1ELISAKitReactivity: Human
大腸埃希氏菌Human TIRAP(Toll/interleukin-1 receptor domain-containing adapter protein) ELISA KitAlias: TIRAP|TIRdomain-containingadapterprotein|AdaptorproteinWyatt|MyD88adapter-likeprotein|TIRAP|MAL|MyD88-2ELISAKitReactivity: Human