實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個；
4、培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號
JHH-2細胞
詳見說明書
FS-X5376
產(chǎn)品名稱：肝癌細胞
培養(yǎng)基：1640
狀態(tài)：貼壁
公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
芹菜素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： N-Trimethylsilylimidazole配子生成素結(jié)合蛋白1抗體包裝50mg
芹菜素-6-C-α-L-吡喃阿拉伯糖-8-C-β-D-...英文名稱： N-Trimethylsilylacetamide鋅指蛋白403/喉癌相關(guān)蛋白1抗體包裝1g
芹菜素-7-O-(2G-鼠李糖)龍膽糖苷英文名稱： 1,1,3,3-Tetramethyldisilazane鳥苷酸環(huán)化酶α2/GCS-α-2抗體包裝5g
芹菜素-7-O-葡萄糖酸苷英文名稱： 1-(tert-Butyldimethylsilyl)imidazoleG蛋白偶聯(lián)受體7抗體包裝1g
秦皮（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： N,O-Bis(tert-butyldimethylsilyl)acetamide 糖基磷脂酰肌錨連接蛋白1抗體包裝250mg
秦皮苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1-(Dimethylisopropylsilyl)imidazole3-磷酸甘油?；D(zhuǎn)移酶2抗體包裝5g
秦皮素（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1,3-Bis(chloromethyl)tetramethyldisilazaneG蛋白修補結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體包裝100g
秦皮素（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Tetramethyl-1,3-diphenyldisilazane富含GC啟動子結(jié)合蛋白1/血管壁相連蛋白抗體包裝25g
秦皮乙素（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： N-Methyl-N-nitrosourethane血管壁相連蛋白樣蛋白1抗體包裝5g
青黛（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： N-AcetylimidazoleG蛋白偶聯(lián)受體151抗體包裝100g
青風(fēng)藤（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1-(Heptafluorobutyryl)imidazole G蛋白偶聯(lián)受體77抗體包裝25g
青果（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Pentafluorobenzyl Bromide精神發(fā)育遲滯相關(guān)蛋白Rab GDI α抗體包裝5g
青蒿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： O-(2,3,4,5,6-Pentafluorobenzyl)hydroxylamine Hydrochloride甘油磷酸二酯酶磷酸結(jié)構(gòu)域4抗體包裝100g
青蒿琥酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： NonaneD-果糖6磷酸轉(zhuǎn)移酶2抗體包裝25g
葡萄座腔菌屬Human ENHO(Adropin) ELISA KitAlias: ENHO|Energyhomeostasis-associatedprotein|AdropinELISAKitReactivity: Human
毛霉Human TARBP2(RISC-loading complex subunit TARBP2) ELISA KitAlias: TARBP2|RISC-loadingcomplexsubunitTARBP2|TARRNA-bindingprotein2|Trans-activation-responsiveRNA-bindingproteinELISAKitReactivity: Human
淺藍灰曲霉Human DRAM1(DNA damage-regulated autophagy modulator protein 1) ELISA KitAlias: DRAM1|DNAdamage-regulatedautophagymodulatorprotein1|Damage-regulatedautophagymodulatorELISAKitReactivity: Human
BacillusHuman TBC1D1(TBC1 domain family member 1) ELISA KitAlias: TBC1D1|TBC1domainfamilymember1ELISAKitReactivity: Human
無菌藥品 無菌檢查（陰性） Human TBPL1(TATA box-binding protein-like protein 1) ELISA KitAlias: TBPL1|TATAbox-bindingprotein-likeprotein1(TBP-likeprotein1)|TBP-relatedprotein|TBP-likefactor|TATAbox-bindingprotein-relatedfactor2(TBP-relatedfactor2)|21kDaTBP-likeprotein|SecondTBPofuniqueDNAprotein(STUD)|ELISAKitReactivity: Human
海氏腸球菌Human THAP4(THAP domain-containing protein 4) ELISA KitAlias: THAP4ELISAKitReactivity: Human
pK18mobsacBHuman MBOAT4(Ghrelin O-acyltransferase) ELISA KitAlias: MBOAT4|OACT4|EC2.3.1.-|ghrelinO-acyltransferase|membraneboundO-acyltransferasedomaincontaining4|Membrane-boundO-acyltransferasedomain-containingprotein4|OACT4|O-acyltransferase(membranebound)domaincontaining4|O-acyltransferasedomain-containingprotein4ELISAKitReactivity: Human
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、50ml離心筒2個
來源：肝癌；腹水轉(zhuǎn)移；男性
芹菜苷; 芹黃苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： N-Methyl-N-TMS-acetamide調(diào)節(jié)蛋白GAL4抗體包裝25g
JHH-2細胞尖孢鐮孢Human TMEM126A(Transmembrane protein 126A) ELISA KitAlias: TMEM126AELISAKitReactivity: Human
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：