公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號
B82細(xì)胞
詳見說明書
FS-X5409
產(chǎn)品名稱：小鼠肺成纖維細(xì)胞
培養(yǎng)基：DMEM高糖90%，胎牛血清10%（1521/1531）
狀態(tài)：成纖維細(xì)胞
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個；
4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細(xì)胞計數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基：
凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：
以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
血竭素高酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： L-Cysteine methyl ester hydrochloride高密度脂蛋白抗體包裝10MG
鴉膽子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Glycine methyl ester hydrochloride蛋白激酶底物相關(guān)蛋白抗體包裝5MG
鴉膽子苦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： L-Glutamic acid dimethyl ester hydrochloride艾滋病病抗體包裝1g
鴉膽子素D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： L-Leucine methyl ester hydrochloride流感病H3N2血凝素抗體包裝250mg
鴨腳樹葉堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Phenylalanine methyl ester hydrochloride人瘤病16型L2抗體包裝5g
鴨跖草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Proline methyl ester hydrochlorideA型病H7N9 M1蛋白抗體包裝1g
亞硫酸氫鈉穿心蓮內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Serine methyl ester hydrochloride蛭素抗體包裝25g
亞麻木酚素（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Tryptophan methyl ester hydrochloride副腫瘤綜合癥小腦變性相關(guān)蛋白抗體包裝5g
煙堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： L-Tyrosine methyl ester 植物熱休克蛋白93抗體包裝25g
延胡索（元胡）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Cysteine ethyl ester hydrochloride重組人瘤病抗體包裝5g
延胡索素（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： H-Phe-OEt.HCl長鏈烯脂酰輔酶A脫氫酶抗體包裝25g
延胡索乙素；消旋延胡索乙素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Glycine ethyl ester hydrochloride羥輔酶A脫氫酶β抗體包裝5g
延齡草苷；地索苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Methionine ethyl ester hydrochloride三羥基三基輔酶A裂解酶抗體包裝1g
芫花素（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Tyrosine ethyl ester hydrochloride 高密度脂蛋白抗體包裝250mg
芫花條（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Aspartic acid β-benzyl ester磷酸化三羥基三基輔酶A還原酶抗體包裝1g
枯草芽孢桿菌Human MT2A(Metallothionein-2) ELISA KitAlias: MT2(Metallothionein-2)|MT2A|CES1|MT-2|MT-II|Metallothionein-2A|Metallothionein-IIELISAKitReactivity: Human
松針散斑殼Human NRG-1(Neuregulin 1) ELISA KitAlias: NRG-1(Neuregulin1)|Heregulin-1|HGL|HRG1-alpha|HRG1-beta1|NRG1|ARIA|GGF2|GGF|glialgrowthfactor|HGLneudifferentiationfactor|HRG|HRG1|HRGA|neuregulin1typeIVbeta1a|MST131|MSTP131|NDFheregulin|alpha(45kD|ERBB2p185-activator)|neuregulin1|neuregulin1typeIVbeta3|pro-neuregulin-1|membrane-boundisoform|pro-NRG1|sensoryandmotorneuronderivedfactor|SMDFELISAKitReactivity: Human
枯草芽孢桿菌Human TUBB(Tubulin beta chain) ELISA KitAlias: TUBβ(β-Tubulin)|TUBB|OK|SW-cl.56|TUBB5|Tubulinbetachain|Tubulinbeta-5chainELISAKitReactivity: Human
大腸埃希氏菌Human MUCL1(Mucin-like protein 1) ELISA KitAlias: MUCL1(Mucin-likeprotein1)|SBEM|ProteinBS106|SmallbreastepithelialmucinELISAKitReactivity: Human
嚙蝕艾肯氏菌Human CD3E(T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain) ELISA KitAlias: CD3E(T-cellsurfaceglycoproteinCD3epsilonchain)|CD3e|CD3eantigen|CD3eantigen|epsilonpolypeptide(TiT3complex)|CD3emolecule|epsilon(CD3-TCRcomplex)|CD3-epsilon|T3E|T-cellantigenreceptorcomplex|epsilonsubunitofT3|T-cellsurfaceantigenT3|Leu-4epsilonchain|TCREELISAKitReactivity: Human
星孢鏈霉菌Human ERCC1(DNA excision repair protein ERCC-1) ELISA KitAlias: ERCC1(ExcisionRepairCrossComplementingRodentRepairDeficiencyComplementation1)|DNAexcisionrepairproteinERCC-1ELISAKitReactivity: Human
大腸埃希氏桿菌Human NRP1(Neuropilin-1) ELISA KitAlias: NRP1(Neuropilin1)|BDCA-4|CD304|BDCA4|CD304antigen|neuropilin1|neuropilin-1|NRPNP1|transmembranereceptor|Vascularendothelialcellgrowthfactor165receptor|VEGF165RELISAKitReactivity: Human
來源：BSL-1
實(shí)驗(yàn)材料：
3、50ml離心筒2個
B82細(xì)胞虎皮粘蓋牛肝菌Human APLN36(Apelin-36) ELISA KitAlias: AP36(Apelin36)ELISAKitReactivity: Human