公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱：惡性黑色素瘤細(xì)胞
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

異去蟛蜞菊內(nèi)酯英文名稱： DL-Alanine肝生長因子激活蛋白抗體包裝5g

異去氫鉤藤堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DL-Tyrosine肝癌衍生生長因子抗體（高遷移率族蛋白1樣蛋白2抗體）包裝100g

異珊瑚菜素英文名稱： DL-Methionine磷酸化組蛋白H3抗體包裝25g

異鼠李素(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DL-Aspartic acid核糖基轉(zhuǎn)移酶1抗體包裝5g

異鼠李素-3-O-槐二糖-7-O-鼠李糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DL-Glutamine乙?；M蛋白H3抗體包裝1g

異鼠李素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DL-Proline乙?；土姿峄M蛋白H3抗體包裝5g

異鼠李素-3-O-葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： DL-Alanine methyl ester hydrochloride組蛋白H2A抗體包裝1g

異鼠李素-3-O-新橙皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： H-Glu(OEt)-OH乙?；M蛋白H2A抗體包裝5g

異飛薊賓英文名稱： N-Acetyl-DL-leucine 乙酰化組蛋白H2B抗體包裝1g

異土木香內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： N6-Cbz-L-Lysine乙?；M蛋白H2B抗體包裝1mg

異夏佛塔苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Esmolol HCl磷酸化組蛋白H2AX抗體包裝10g

異型南五味子丁素（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Esmolol HCl磷酸化熱休克蛋白27抗體包裝100g

異櫻花素;異櫻花亭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： H-Met-OtBu·HCl磷酸化熱休克蛋白70抗體包裝25g

異澤蘭黃素（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Maltitol 磷酸化熱休克因子1抗體包裝500g

異紫花前胡內(nèi)酯英文名稱： L-Threonine methyl ester hydrochloride磷酸化熱休克因子1抗體包裝5g
A375-EGFP細(xì)胞科氏葡萄球菌科氏亞種Human PRDX6(Peroxiredoxin-6) ELISA KitAlias: PRDX6|aiPLA2|AOP2|NSGPx|1-Cys|24kDaprotein|Acidiccalcium-independentphospholipaseA2|aiPLA21-CysPRX|Antioxidantprotein2|Non-seleniumglutathioneperoxidase|Redbloodcellspagespot12|Liver2Dpagespot40|NSGPx1-Cysperoxiredoxin|p29|peroxiredoxin6|PRXELISAKitReactivity: Human

水生哈薩克斯坦酵母Human TTN(Titin) ELISA KitAlias: TTN|Titin|Connectin|RhabdomyosarcomaantigenMU-RMS-40.14|CMD1G|CMH9|CMPD4|EOMFC|HMERF|LGMD2J|MYLK5|TMDELISAKitReactivity: Human

美味牛肝菌Human FSCN1(Fascin) ELISA KitAlias: Fascin|FSCN1|FAN1|HSN|Singed-likeProtein|SNL|FAN1|55kDaactin-bundlingprotein|fascinhomolog1|actin-bundlingprotein(StrongylocentrotuspurpuRatus)|p55|actinbundlingprotein|singed(Drosophila)-like(seaurchinfascinhomologlike)|singed-like(fascinhomolog|seaurchin)|Singed-likeproteinELISAKitReactivity: Human

大腸埃希氏菌Human TPI1(Triosephosphate isomerase) ELISA KitAlias: TIM(Triosephosphateisomerase)|TPI1|TPI|Triose-phosphateisomeraseELISAKitReactivity: Human

爪哇根霉Human RNASE3/ECP(Ribonuclease A3/Eosinophil Cationic Protein) ELISA KitAlias: RNASE3|ECP(RibonucleaseA3|EosinophilCationicProtein)ELISAKitReactivity: Human

鏈格孢Human PDXK(Pyridoxal kinase) ELISA KitAlias: PDXK|Pyridoxalkinase|Pyridoxinekinase|PRED79|C21orf124|C21orf97|PKH|PNK|VitaminB6Kinase|HEL-S-1aELISAKitReactivity: Human

枯草芽胞桿菌Human POMGNT1(Protein O-linked-mannose beta-1,2-N-acetylglucosaminyltransferase 1) ELISA KitAlias: POMGNT1|ProteinO-linked-mannosebeta-1|2-N-acetylglucosaminyltransferase1|POMGnT1|UDP-GlcNAc:alpha-D-mannosidebeta-1|2-N-acetylglucosaminyltransferaseI.2|GnTI.2|MDDGA3|MDDGB3|MDDGC3|MEB|MGAT1.2ELISAKitReactivity: Human

刺囊毛霉Human HMGCS1(Hydroxymethylglutaryl-CoA synthase, cytoplasmic) ELISA KitAlias: HMGCS1(Hydroxymethylglutaryl-CoAsynthase|cytoplasmic)|HMG-CoAsynthase|HMGCS|3-hydroxy-3-methylglutarylcoenzymeAsynthaseELISAKitReactivity: Human