公司細胞現(xiàn)貨供應,質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
PC12未分化細胞 |
詳見說明書 |
FS-X5545 |
產(chǎn)品名稱:大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞未分化
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
凍存培養(yǎng)基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。
1)細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu),可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。
1.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀,將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘?,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
蒲黃(標準品)英文名稱: Anthraquinone線粒體鐵轉(zhuǎn)運蛋白1抗體包裝500g
蒲葵子(標準品)英文名稱: Cynarin磷酸化原癌基因c-Met抗體包裝100g
七葉膽苷XVII(標準品)英文名稱: 1,5-Dicaffeoylquinic acid磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體包裝25g
七葉皂苷A英文名稱: Dihydrotanshinone I甘露聚糖結(jié)合凝集素絲氨酸肽酶1抗體包裝500g
七葉皂苷B英文名稱: Columbianadin胃動素受體抗體包裝100g
七葉皂苷C英文名稱: Dihydromyricetin特異性MLT5蛋白抗體包裝25g
七葉皂苷鈉(標準品)英文名稱: Dihydromyricetin軟骨基質(zhì)蛋白抗體包裝5g
榿木酮英文名稱: Sennoside A絲裂原活化蛋白激酶MKK7抗體包裝1g
漆姑草(標準品)英文名稱: Sennoside B甘露聚糖結(jié)合凝集素絲氨酸肽酶2抗體包裝5g
漆黃素(標準品)英文名稱: Fangchinoline微小染色體維持缺陷蛋白2抗體包裝1g
齊墩果酸(標準品)英文名稱: Tetrandrine微小染色體維持缺陷蛋白3抗體包裝5g
齊墩果酸-3-O-β-D葡萄糖( 1→3)-α-L-鼠...英文名稱: 5-Methoxypsoralen基質(zhì)金屬蛋白酶-26抗體包裝1g
齊墩果酮酸英文名稱: Glycyrrhetinic acid絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體包裝25g
奇任(標準品)英文名稱: LiquiritinMYOZ抗體包裝5g
蘄蛇(標準品)英文名稱: Liquiritigenin單核趨化蛋白2抗體包裝100g
PC12未分化細胞藍綠小四孢菌Human LRRK1 (Leucine-rich repeat serine/threonine-protein kinase 1) ELISA KITAlias: LRRK1ELISAKitReactivity: Human
根瘤菌Human LCT (Lactase-phlorizin hydrolase) ELISA KITAlias: LCTELISAKitReactivity: Human
百脈根中間根瘤菌Human LRGUK (Leucine-rich repeat and guanylate kinase domain-containing protein) ELISA KITAlias: LRGUKELISAKitReactivity: Human
黑曲霉Human LACE1 (Lactation elevated protein 1) ELISA KITAlias: LACE1ELISAKitReactivity: Human
納西桿菌屬Human TFCP2(Alpha-globin transcription factor CP2) ELISA KitAlias: TFCP2|Alpha-globintranscriptionfactorCP2|SAA3enhancerfactor|TranscriptionfactorLSF|LSF|SEF|LBP1C|LSF1D|TFCP2CELISAKitReactivity: Human
乳酸乳球菌乳亞種Human IPP (Actin-binding protein IPP) ELISA KITAlias: IPPELISAKitReactivity: Human
棘孢曲霉Human LBX1 (Transcription factor LBX1) ELISA KITAlias: LBX1ELISAKitReactivity: Human
絳紅鏈霉菌Human PTN(Pleiotrophin) ELISA KitAlias: PTN|Pleiotrophin|Osteoblast-specificfactor1|OSF-1|Heparin-bindingneuriteoutgrowth-promotingfactor1|HBNF-1|Heparin-bindinggrowth-associatedmolecule|HB-GAM|Heparin-bindingbrainmitogen|HBBM|Heparin-bindinggrowthfactor8|HBGF-8|neuritegrowth-promotingfactor1ELISAKitReactivity: Human