商品屬性:
貨號 |
規(guī)格 |
產(chǎn)品名稱 |
A-Hc2227-20 μl |
20 μl |
pET-28a(+) Seamless Cloning Kit(線性化質(zhì)粒) |
產(chǎn)品介紹:
pET-28a(+) Seamless Cloning Kit(線性化質(zhì)粒)pET-28a(+)載體為高水平的原核表達載體,在N端含有His-Tag, Thrombin(凝血酶)酶切位點,T7-Tag,在C端具有His-Tag。本產(chǎn)品提供pET-28a(+)經(jīng)EcoRⅠ酶切后的線性化載體,可用無縫克隆技術(shù)將單個或多個DNA片段組裝到載體上。
產(chǎn)品特點:
1. pET-28a載體為原核表達載體,具有N-His, N-Thrombin, N-T7和C-His。
操作步驟:
1. pET-28a(+)線性化載體使用方法:
公司正在出售的產(chǎn)品:
無縫克隆技術(shù)可在重組酶的作用下,只需一步反應(yīng),便可將片段克隆到任何載體中的任意位置,得到重組質(zhì)粒。無縫克隆技術(shù)作為一種非常強大的克隆技術(shù),具有快速、簡便、高效、多片段組裝和定向克隆等特點,用于單個 DNA 片段的克隆,多個 DNA 片段組裝克隆以及多位點突變構(gòu)建等實驗?zāi)康摹?
2. pET-28a經(jīng)EcoRⅠ酶切后的線性化載體,省時省力。
3. 無縫克隆技術(shù)只需要簡單的 PCR 擴增就可以制備片段DNA。
4. 可以克隆長片段和多片段DNA。
5. 簡單、快速、定向克隆。
(1) pET-28a(+)線性化載體當做克隆載體使用,可以在擴增PCR產(chǎn)物的
上游引物 5’端添加序列:GCCTGGTGCCGCGCGGCAGCCATATG(需要5’端HIS標簽時)
或者AACTTTAAGAAGGAGATATACCATG(不需要5’端HIS標簽時)
下游引物 5’端添加序列:CTCAGTGGTGGTGGTGGTGGTGCTCGAG(需要3’端HIS標簽時)
或者CTCAGTGGTGGTGGTGGTGGTGCTCGAGTCA(不需要3’端HIS標簽時)
通過無縫克隆連接到pET-28a(+)中。
(1) 測序引物
T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'
T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'
-2
pET-28a(+)線性化載體為 EcoRⅠ酶切后的線性化載體,圖譜及多克隆位點
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