商品屬性：
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貨號 |
規(guī)格 |
產(chǎn)品名稱 |
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A-PJ1074-100T |
100T |
6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit |
儲存條件：
6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit請置于-20°C，可保存 3 年；避免反復(fù)凍融。
產(chǎn)品介紹：
本試劑盒采用穩(wěn)定高效的反轉(zhuǎn)錄預(yù)混體系 5×Fast RT MasterMix 進(jìn)行 RNA 的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，使用時(shí)只需加入模板、 引物和 RNase Free H2O 即可，大大簡化了操作過程、提高 了效率、減少了操作過程中的人為誤差。 該預(yù)混體系包含快速 MLV7 反轉(zhuǎn)錄酶、dNTP、反應(yīng) Buffer 和 RNase Inhibitor。該試劑盒采用的 MLV7 反轉(zhuǎn)錄酶 具有以下特性：RNase H 活性缺失，從而避免反轉(zhuǎn)錄過程中 降解 RNA；經(jīng)過突變文庫篩選，使得其熱穩(wěn)定性更強(qiáng)，可耐 受 50℃ 高溫反應(yīng)，在 60℃ 條件下仍然具有 30%以上活性， 利于打開 RNA 二級結(jié)構(gòu)，從而提高復(fù)雜 RNA 模板的擴(kuò)增性 能；含有快速合成結(jié)構(gòu)域，將 MLV 的延伸速度提高了 3-4 倍，因此適用于快速反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)；優(yōu)化的反轉(zhuǎn)錄 Buffer 系統(tǒng)， 可以獲得更高產(chǎn)量的 cDNA，從而提高后續(xù)檢測的靈敏度。 合成的**鏈 cDNA 可廣泛用于 2nd Strand 的合成、雜交、 PCR 擴(kuò)增、Real-Time PCR 反應(yīng)等。
應(yīng)用：
（1）該制品可有效反轉(zhuǎn)錄 mRNA、tRNA、LncRNA、ncRNA
（2）該制品不可反轉(zhuǎn)錄 microRNA
適用范圍：
1. 按以下組分配制反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液
Total RNA or Poly(A) RNA 0.1-2 μg
5×Fast RT MasterMix 4 μl
*20×Oligo dT(25)&Random Primer 1 μl
Rnase Free H2O Up to 20 μl
*注：反轉(zhuǎn)錄引物可根據(jù)需要改用特異性引物。
2.反應(yīng)程序
50°C 5 min（cDNA 合成）
95°C 1 min（失活 MLV）
3. 采用 0.25-2μl 反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，作為后續(xù)定量 PCR 或 PCR的擴(kuò)增模板即可。
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