商品屬性:
貨號 |
規(guī)格 |
產(chǎn)品名稱 |
A-PJ1084-25T |
25T |
一步法miRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒 |
A-PJ1084-100TX20μl |
100TX20μl |
一步法miRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒 |
儲存條件:
一步法miRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒請置于-20°C,可保存 2 年;避免反復(fù)凍融
產(chǎn)品介紹:
由于 miRNAs 分子序列較小,僅 20nt 左右,沒有 真核生物特有的 Poly(A)尾巴結(jié)構(gòu),采用傳統(tǒng) Oligo dT 引 物和隨機(jī)引物很難獲得從 miRNA 到 cDNA 的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn) 物。 公司開發(fā)出一套全新的加 A 法 miRNA 反轉(zhuǎn) 錄試劑盒,基于 Peter 改良的 miR-Q 技術(shù), 可以對成熟的 miRNA 同時(shí)完成加 A 反應(yīng)和反轉(zhuǎn)錄反應(yīng), 直接獲得含有特異性 tag 和 15(T)的 cDNA 產(chǎn)物(如圖 1 所示)。該方法使得 miRNA 反轉(zhuǎn)錄與 mRNA 的反轉(zhuǎn)錄一 樣輕松。直接將提取的 miRNA 與反應(yīng)緩沖液混合物混合, 并置于 PCR 儀上 1 小時(shí)即可獲得高濃度的、包含所有 miRNAs 分子的 cDNA 產(chǎn)物。獲得的 cDNA 產(chǎn)物適用于 HG miRNA 熒光定量 PCR 試劑盒進(jìn)行定量檢測,該方法 已被大量文獻(xiàn)所采用。
操作方法:
1. 按以下組分配制反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液
miRNA(0.01-0.1 μg)or Total RNA 0.1-2 μg
4×One step miRNA RT Solution 5 μl
*10×miRNA RT Primer 2 μl
Rnase Free H2O Up to 20 μl
*特別說明: 10×miRNA RT Primer 引物為
5’-CAGGTCCAGTTTTTTTTTTTTTTTVN-3’,定量擴(kuò)增
用特異性上下游引物進(jìn)行擴(kuò)增,圖 2 是以 hsa-miR-21 為
實(shí)例說明特異性上下游引物的設(shè)計(jì)方法
2. 在 PCR 儀上按以下條件進(jìn)行反應(yīng):
37°C 60min
95°C 5min
3. 獲得 cDNA 產(chǎn)物后使用 HG miRNA 熒光定量 PCR 試劑盒進(jìn)行 miRNA 定量檢測。
公司正在出售的產(chǎn)品:
漿(清)DNA磁珠法提取試劑盒 |
豬輪狀病毒B群RT-PCR試劑盒 |
2×Taq PCR MasterMix(for PAGE 不含染料 ) |
白鮮皮染料法PCR鑒定試劑盒 |
拭子RNA提取試劑盒 |
玉米NOS/SS PCR檢測試劑盒 |
熱穩(wěn)定無機(jī)焦磷酸酶 |
蠶白僵菌PCR檢測試劑盒 |
2×Pfu PCR MasterMix(含染料)3×Taq Mix高保真預(yù)混液 |
羅西奧病毒RT-PCR試劑盒 |
1×Taq PCR MasterMix(purple) |
禽腺病毒B型PCR試劑盒 |
組織/細(xì)胞/毛發(fā)微量基因組DNA提取試劑盒 |
禽腺病毒PCR試劑盒 |
中大量液RNA提取試劑盒 |
羅布羅布芽生菌PCR檢測試劑盒 |
植物基因組 DNA 提取擴(kuò)增試劑盒 |
鹿源性成分(Deer)核suan檢測試劑盒 |
一步法超級熒光定量PCR試劑盒(探針) |
禽腦脊髓炎病毒(AEV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
液基因組 DNA 提取系統(tǒng)(0.1-10ml鹽析法) |
豬弓形蟲PCR檢測試劑盒 |
清漿microRNA提取試劑盒 |
膽suanELISA試劑盒 |
**基因組 DNA 快速提取試劑盒 |
蒼白蛋白ELISA試劑盒 |
無內(nèi)**Strep tagII Benzonase核酸酶 |
一步法miRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒皮質(zhì)su2ELISA試劑盒 |
唾液基因組 DNA 快速提取試劑盒 |
腸道病毒71型ELISA試劑盒 |