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產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:大腸桿菌蛋白提取液

  • 產(chǎn)品型號:A-PJ1097
  • 產(chǎn)品廠商:撫生
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
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詳情介紹:

商品屬性:


貨號

規(guī)格

產(chǎn)品名稱

A-PJ1097-100ml

100ml

大腸桿菌蛋白提取液

儲存條件:


大腸桿菌蛋白提取液儲存:置于 4°C 可保存 2 年。

產(chǎn)品介紹:


生產(chǎn)的大腸桿菌蛋白提取液采用獨(dú)特的中性裂解 配方,從而*大限度的提高了后續(xù)提取蛋白的活性。使用該 溶液從大腸桿菌中提取蛋白不需要超聲波破碎等復(fù)雜的操 作步驟,溶液置于 4°C 可長期保存,使用方便。該溶液室溫 30min 可破碎 95%以上的細(xì)胞,裂解后的溶液可直接通過 Ni-NTA 等純化填料進(jìn)行蛋白純化。該溶液既可適用于小量 蛋白表達(dá)檢測,也適用于大量蛋白的表達(dá)純化試驗(yàn);既適用 于純化可溶型蛋白,也適用于純化包涵體蛋白。
主要特征
? 單組分溶液,使用方便
? 裂解迅速,蛋白不會變性
? 適用于小量或大規(guī)模蛋白表達(dá)
? 適用于可溶性蛋白和包涵體純化
應(yīng)用:大腸桿菌的裂解和包涵體純化。

 

操作方法:


? 可溶型蛋白操作方法(1 ml 菌液為例)
1. 8,000rpm 室溫離心 3min 后,棄上層培養(yǎng)基,留取管底部菌體(盡量棄除掉培養(yǎng)基)。
2. 加入 200 μl(重懸體積不得少于 50 μl)大腸桿菌蛋白提取液重懸菌體,用吸頭吹打至無可見細(xì)胞團(tuán)塊。
注:為降低溶液粘度,可加入 Benzonase 核酸內(nèi)切酶至 0.25U/μL;加入終濃度為 1 mg/ml 的溶菌酶效果更佳。
3. 置于室溫孵育 30-60min,期間輕彈離心管數(shù)次以加速裂解。
4. 裂解完成后 13,000rpm 于 4℃離心 15-20min,將上清轉(zhuǎn)移至新的容器中,溶液可直接進(jìn)行下一步純化或檢測試驗(yàn)。
? 包涵體蛋白操作方法
5. 上述步驟 4 中,棄上清,保留沉淀組分,用 200 μl 的大腸桿菌蛋白提取液重懸沉淀。
6. 加入溶菌酶至終濃度 1 KU/ml,混合均勻,室溫孵育 10min。
7. 加入 800 μl 的**水混合均勻。
8. 13,000 rpm 室溫離心 15-20min,棄上清后用 900 μl **水重懸沉淀,然后加入 200 μl 大腸桿菌蛋白提取液,混合均勻。
9. 13,000rpm 室溫離心 15-20min,重復(fù)步驟 8 三至五次。
10. 將沉淀溶解于變性溶液中,進(jìn)行下一步純化或復(fù)性試驗(yàn)。

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