商品屬性：
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貨號 |
規(guī)格 |
產(chǎn)品名稱 |
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A-PJ1102-5ml |
5ml |
Strep-Tactin XT Resin |
儲存條件：
Strep-Tactin XT Resin儲存：4~8℃可保存 2 年。
產(chǎn)品介紹：
Strep-Tactin XT（Strep-Tactin 的升級產(chǎn)品）瓊脂糖凝膠 FF 是一種將 Strep-Tactin XT 共價交聯(lián)在瓊脂糖凝膠微球上，形成的生物親和層析分離介質(zhì)。該純化介質(zhì)主要用于純化 Strep tag II 或 Twin strep tag 標(biāo)簽蛋白。Strep tagII 標(biāo)簽為 8 個氨基酸的小標(biāo)簽（WSHPQFEK），由于標(biāo)簽小，僅為 1kDa 左右，一般不影響融合后蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能，常用于融合表達(dá)蛋白質(zhì)的檢測和純化。由于 Strep-Tacin XT 對 Strep tag II 標(biāo)簽具有高度特異性，一步純化就能獲得高純度的蛋白質(zhì)樣品。Strep tag II 標(biāo)簽蛋白與凝膠結(jié)合后可使用脫硫生物素競爭方式進行洗脫，該洗脫方式比較溫和，對蛋白影響極小。由于 Strep-Tactin 對 Strep tag II 標(biāo)簽具有很強的吸附能力，在生物素的洗脫過程中不易完全洗脫，造成洗脫效率較低?？梢酝ㄟ^在脫硫生物素洗脫液中添加 25mM NaOH 來提高蛋白回收效率，而添加 NaOH 后會造成 Strep-Tactin從填料上脫落，進而污染純化蛋白。本產(chǎn)品為升級的 Strep-Tactin XT，其可耐受高濃度的 NaOH 洗脫（0.5M），除此外 Strep-Tactin XT 可耐受 1%SDS、6M 尿素，因此使用該填料可以在變性條件下純化標(biāo)簽蛋白。
保存液：
10mM Tris-HCl，pH7.5；100mM NaCl；20%乙醇
實驗用溶液：
(1) 結(jié)合緩沖液：根據(jù)自身蛋白性質(zhì)來定，一般推薦 50mM Tris-HCl(pH8.0), 150mM NaCl（或采用 PBS）
(2) 洗滌液與結(jié)合緩沖液相同，一般洗滌 5~20 個柱體積。
(3) 洗脫緩沖液：在結(jié)合緩沖液中加入 2.5~3.5mM D-Biotin。或根據(jù)蛋白性質(zhì)和用途靈活使用其它洗脫條件，如 2.5mMD-Biotin+10mM NaOH；25~50mM NaOH；0.2% SDS：
(4) 柱再生：0.2M NaOH 洗滌 3~5 個柱體積；1M NaCl 洗滌 3~5 個柱體積；PBS 平衡 3~5 個柱體積。
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