商品屬性:
貨號(hào) |
規(guī)格 |
產(chǎn)品名稱 |
A-PJ1117-100U |
100U |
南極熱敏UDG |
A-PJ1117-500U |
500U |
南極熱敏UDG |
儲(chǔ)存條件:
南極熱敏UDG置于-20°C 可保存 2 年。
產(chǎn)品介紹:
南極熱敏 UDG 是來(lái)源于嗜冷海洋**經(jīng)大腸桿菌表達(dá)純化的的重組蛋白。
該酶能有效地水解單鏈或雙鏈DNA 上的尿嘧啶,產(chǎn)生的缺嘧啶位點(diǎn),在高溫或高 pH下,極易水解斷裂。該酶對(duì) RNA 無(wú)活性,主要用于 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的防污染。大腸桿菌來(lái)源的尿嘧啶-DNA 糖基化酶較為耐熱,經(jīng) 95℃10min 處理仍會(huì)殘留有少量的尿嘧啶-DNA 糖基化酶活性,導(dǎo)致含有 dU 堿基的 PCR 產(chǎn)物的降解。
而來(lái)源于嗜冷海洋**的熱敏型 UDG 在 50℃5min 即完全失活,在進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增前,在 PCR 混合液中添加尿嘧啶-DNA 糖基化酶(熱敏性),25℃ 2min 即可消除以往 PCR 產(chǎn)物的殘留污染,由于尿嘧啶-DNA 糖基化酶(熱敏性)在 PCR 循環(huán)的 94℃變性一步便可被滅活,因此不會(huì)影響新的含 dU 的 PCR 產(chǎn)物。
活性定義:
在標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)體系下,37°C 每分鐘催化 60 pmol尿嘧啶從含尿嘧啶的雙鏈 DNA 上釋放所需要的酶量為一個(gè)活性單位。
反應(yīng) Buffer:
ThermoLabile Uracil DNA Glycosylase (UDG)與絕大多數(shù)的 PCR 聚合酶反應(yīng)緩沖液都是兼容的,但在高離子濃度(>100 mM)下活性會(huì)受到抑制。在防污染 PCR 中的使用濃度推薦為 10 mU-50 mU/μ(l 25℃下作用 2min 即可),在不同的緩沖系統(tǒng)下可能會(huì)有差別。
酶儲(chǔ)存液:20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM DTT, ,50% Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100, pH 7.5。
熱失活:50°C,5min。
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