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組織來源 |
胰腺組織 |
規(guī)格 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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細(xì)胞分類 |
人原代細(xì)胞 |
培養(yǎng)條件 |
氣相：空氣，95%；CO2，5% |
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生長特性 |
貼壁培養(yǎng) |
細(xì)胞形態(tài) |
島狀成團(tuán)生長 |
細(xì)胞簡介：
胰腺分為外分泌腺和腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。
腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán) -胰島所組成，胰島主要由4種細(xì)胞組成：胰島能分泌胰島素與胰高血糖素等。人類的胰島細(xì)胞按其染色和形態(tài)學(xué)特點(diǎn)，主要分為α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞約占胰島細(xì)胞的20%，分泌胰高血糖素；β細(xì)胞占胰島細(xì)胞的60%-70%，分泌胰島素；γ細(xì)胞占胰島細(xì)胞的10%，分泌；PP細(xì)胞數(shù)量很少，分泌胰多
細(xì)胞特性：
1） 細(xì)胞來源于人正常胰腺組織。
2) 細(xì)胞鑒定：雙硫腙（DTZ）化學(xué)染色染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長方式：島狀成團(tuán)生長，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基：
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(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng)，是建立細(xì)胞系的步，是一項(xiàng)基本技術(shù)。原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長特性，適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
原代細(xì)胞的分離方法：
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。二、實(shí)體組織材料的分離方法
對于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。
（一）機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡便、快速,但對組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
（二）消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。
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單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 Anti-SLC16A7/MCT2
受體結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶2抗體 Anti-RIP2
神經(jīng)上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化基因1抗體 Anti-NET1/Glyt2
細(xì)胞周期蛋白1結(jié)合蛋白抗體 Anti-ZNHIT1/CGBP1
晶狀體發(fā)育相關(guān)蛋白Six3抗體
Six3
LYPD2蛋白抗體
LYPD2
突觸相關(guān)蛋白23抗體 Anti-SNAP23
過氧化還原酶5/6抗體 Anti-PRDX5/PRDX6
p21蛋白抗體 Anti-P21/CDKN1A
四分子交聯(lián)體5抗體 Anti-Tetraspan 5
兔抗羊IgM抗血清
人胰島細(xì)胞MEIG1蛋白抗體
MEIG1
細(xì)胞周期蛋白3抗體
DNAJA2