(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng),是建立細(xì)胞系的步,是一項基本技術(shù)。原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長特性,適宜用于敏感性試驗、細(xì)胞分化等實驗研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
商品屬性:
組織來源 |
輸尿管組織 |
規(guī)格 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
細(xì)胞分類 |
小鼠原代細(xì)胞 |
培養(yǎng)條件 |
氣相:空氣,95%;CO2,5% |
生長特性 |
貼壁培養(yǎng) |
細(xì)胞形態(tài) |
長梭形細(xì)胞 |
細(xì)胞簡介:
輸尿管位于腹膜后,為一肌肉粘膜所組成管狀結(jié)構(gòu),上起自腎盂,下終止于膀胱三角。輸尿管管壁分為 4層:黏膜表面、固有層、輸尿管肌層和外膜。其中,肌層主要由內(nèi)縱和外環(huán)兩層平滑肌組成。
細(xì)胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常輸尿管組織。
2)細(xì)胞鑒定:平滑肌肌動蛋白(α-SMA)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:長梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基:
我們推薦使用 DELF原代 平滑肌 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
公司正在出售的產(chǎn)品:
D-LDHELISAKit
Fas相互作用蛋白激酶3抗體
HIPK3
擬南芥ACA11抗體
ACA11
小鼠FMS樣激酶3(Flt3)elisa檢測試劑盒
乳制品尿素比色法定量檢測試劑盒
線粒體膜/胞漿蛋白提取試劑盒100T
大鼠一氧化碳血紅蛋白(HbCO)elisa檢測試劑盒
細(xì)胞抗原6H抗體
LY6H
細(xì)胞色素P450 26B抗體
Cytochrome P450 26B
鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug+SNAIL抗體 Anti-SNAIL + SLUG
RNA結(jié)合蛋白15抗體 Anti-RBM15/SPEN
核孔復(fù)合體蛋白抗體 Anti-NUP107/Nuclear Pore Complex Proteins
相關(guān)蛋白2抗體(轉(zhuǎn)錄因子YY1結(jié)合蛋白1抗體) Anti-YY1AP1/HCCA2
膜內(nèi)蛋白酶5抗體
SPPL2C
甲基化樣蛋白21B抗體
METTL21B
DNA聚合酶δ相互作用蛋白3抗體 Anti-SKAR
親環(huán)素相關(guān)蛋白1抗體 Anti-PPIL1
尿激酶型纖溶酶原激活因子抗體 Anti-PLAU/UPA/Urokinase
三葉肽因子2抗體 Anti-TFF2
Cy3標(biāo)記牛IgM
小鼠輸尿管平滑肌細(xì)胞絲氨酸蛋白酶抑制劑B1抗體 Anti-SERPINB1
Cy5標(biāo)記的小鼠抗兔IgM
Mouse Anti-Rabbit IgM / Cy5
唾液酸結(jié)合球蛋白樣凝集素9抗體
原代細(xì)胞的分離方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機(jī)械分散法
特點:簡便、快速,但對組織機(jī)械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團(tuán)塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長。