(1)原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞的培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的培養(yǎng),是建立細(xì)胞系的步,是一項(xiàng)基本技術(shù)。原代細(xì)胞接近和能反映體內(nèi)生長(zhǎng)特性,適宜用于敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
商品屬性:
組織來(lái)源 |
胃組織 |
規(guī)格 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
細(xì)胞分類(lèi) |
小鼠原代細(xì)胞 |
培養(yǎng)條件 |
氣相:空氣,95%;CO2,5% |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁培養(yǎng) |
細(xì)胞形態(tài) |
長(zhǎng)梭形細(xì)胞 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
胃壁一般由 3層組織構(gòu)成,內(nèi)層是粘膜層,外層是漿膜層,中間是由平滑肌組成的肌層。成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織中常見(jiàn)的細(xì)胞,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞的主要功能之一是合成膠原蛋白及其他細(xì)胞外基質(zhì),在組織器官纖維化過(guò)程中發(fā)揮重要作用。
細(xì)胞特性:
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常胃組織。
2)細(xì)胞鑒定:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:長(zhǎng)梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基:
我們推薦使用 DELF原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
公司正在出售的產(chǎn)品:
細(xì)胞活性檢測(cè)試劑盒-綠色熒光500T
Notch配體Jagged 2蛋白抗體
Jagged 2
神經(jīng)元電壓門(mén)控鈣通道γ3/L-type Ca++CP γ3抗體
CACNG3
細(xì)胞短鏈脂酰合成酶(ACYL COA SYNTHETASE)
山羊丙二醛(MDA)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠可溶性CD14(sCD14)elisa檢測(cè)試劑盒
動(dòng)物鱗片(Scales)組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒
肌微管蛋白MTMR13抗體
MTMR13
腎母細(xì)胞瘤X蛋白抗體
FAM123B
乳腺癌雌誘導(dǎo)蛋白抗體 Anti-TFF1/BCEI
RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體 Anti-RASSF8
磷酸化孤兒核受體蛋白Nur77抗體 Anti-Phospho-Nur77(Ser351)
線(xiàn)粒體二羧酸載體蛋白20抗體 Anti-SLC25A20
XAB2蛋白抗體
XAB2
視網(wǎng)膜鈉/鉀/鈣交換體2抗體
NCKX2
受體4抗體 Anti-SSTR4
可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白22A17抗體 Anti-NGALR/Slc22A17
Ras樣蛋白B抗體 Anti-RALB
甲狀腺受體相互作用13/瘤16型E1結(jié)合蛋白抗體 Anti-TRIP13/16E1BP
大鼠肺癌腫瘤抑制因子1(TSLC1)elisa分析檢測(cè)試劑盒
小鼠胃成纖維細(xì)胞突觸融合蛋白1抗體 Anti-Syntaxin 1A(brain)
Cy5標(biāo)記的兔抗人IgM
Rabbit Anti-Human IgM / Cy5
神經(jīng)細(xì)胞突觸蛋白PCLO抗體
原代細(xì)胞的分離方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,簡(jiǎn)單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料,由于細(xì)胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細(xì)胞充分分散,形成細(xì)胞懸液,可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。
(一)機(jī)械分散法
特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大,而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。
(二)消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng),使團(tuán)塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時(shí)再采用機(jī)械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散,制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液,接種培養(yǎng)后,細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。