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細(xì)胞簡(jiǎn)介:
骨骼肌細(xì)胞( Skeletal muscle cells )是人和動(dòng)物體內(nèi)大的細(xì)胞之一,它們是由成肌細(xì)胞 (Myoblasts) 融合而來的多核細(xì)胞,故骨骼肌的形成是一個(gè)非常復(fù)雜的過程,并需要多種細(xì)胞信號(hào)通路的參與,包括 phosphatidylinositol 3-kinase , calcineurin , STAT3 和 MAPK 等。原代骨骼肌細(xì)胞的培養(yǎng)是研究細(xì)胞分化過程的有效的模型。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 |
種屬 |
牛 |
|
組織來源 |
肌肉組織 |
規(guī)格 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號(hào) |
A01X2303 |
細(xì)胞形態(tài) |
長(zhǎng)梭狀細(xì)胞 |
培養(yǎng)條件 |
氣相:空氣,95%;CO2,5% |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁培養(yǎng) |
細(xì)胞特性:
1) 1mL 凍存細(xì)胞懸液裝于 1.8ml 的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在 -80 ℃的條件下保存 1 個(gè)月。
2) T-25 培養(yǎng)瓶充滿完全
推薦培養(yǎng)基:
我們推薦使用 原代 骨骼肌 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)原代骨骼肌細(xì)胞的培養(yǎng)基。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
① 靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
a 細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性
b 細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L。
c 培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)。
d 胎牛血清濃度為10%-80%。
e 應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。。
f 在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮。
g 待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液
h 用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
② 懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)要求
a 原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞
b 短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行
c 細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn)。
d 長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng)。
f 細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次
g 細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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